Обследованы 181 больной раком легкого и 100 практически здоровых людей в целях изучения полиморфных вариантов генов ферментов второй фазы биотрансформации ксенобиотиков (GSTM1, GSTT1). Отмечено повышение частоты нулевого генотипа генов GSTM1, GSTT1 у больных раком легкого, особенно с метастазами в регионарных лимфатических узлах.

В настоящей работе проведено сравнительное изучение показателей системы репарации ДНК и полиморфизма генов ферментов биотрансформации у больных раком легких (РЛ), хроническими обструктивными болезнями легких (ХОБЛ) и у здоровых лиц. Обследованы 50 больных центральным РЛ (41 мужчина, 9 женщин), которые находились на лечении в клинике НИИ онкологии THЦ СО РАМН г. Томска. Средний возраст пациентов равен 56,57 ± 7,96 лет. Группы сравнения составили 46 больных хроническим бронхитом с предопухолевыми (диспластическими) изменениями бронхиального эпителия (диагноз был подтвержден морфологически и эндоскопически) и 50 здоровых мужчин соответствующего возраста без бронхолегочной патологии. Репаративную активность клеток исследовали в лимфоцитах периферической крови. Образцы ДНК больных РЛ и ХОБЛ были протипированы по полиморфизму 3 генов биотрансформации: GSTT1, GSTM1 и CYP2C19. Полученные результаты указывают на снижение функциональной активности ДНК репарационных систем как у больных хроническим бронхитом, так и РЛ. Изучение интенсивности репаративного синтеза ДНК у больных РЛ в большинстве случаев выявило значительное ингибирование этого процесса. При этом установлена связь между интенсивностью репаративного синтеза ДНК с гистологическим типом опухоли и стадией заболевания. Больные РЛ характеризуются сниженной частотой нулевого генотипа гена GSTM1, и этот маркер может быть специфичен именно для данной нозологии. Распределение генотипов в выборке больных РЛ статистически значимо отличается от такового у здоровых лиц (р = 0,047). При этом распределение генотипов у больных ХОБЛ близко к таковому у здоровых. Отличий между больными ХОБЛ и больными РЛ не получено из-за малого размера выборок. Необходимы дальнейшие исследования на больших по объему выборках. Практическим выходом такого рода исследований может быть создание генотипических тест-систем предиктивной диагностики повышенной подверженности к онкологической патологии в конкретных средовых условиях.

Механизмы развития микроангиопатий при сахарном диабете типа 1 (СД1) сложны и активно изучаются. Новые данные о патогенезе СД1 позволят наметить реальные пути исследования, направленные на профилактику осложнений данного заболевания. Цель работы заключалась в изучении вклада полиморфных вариантов VNTR-полиморфизма гена эндотелиальной NO-синтазы (NOS3) и I/D-полиморфизма ангиотензинпревращающего фермента (АСЕ), состояния систем протеолиза и нарушений липидного обмена в развитие диабетической нефропатии (ДН). Обследовано 197 детей, больных СД1, за 1996-2002 гг. (средний возраст 13,1 ±0,3 года). Контрольную группу составили 32 практически здоровых ребенка, средний возраст 12,8 ±0,1 года. ДН имела место у 44 детей (19 мальчиков и 25 девочек). Установлено, что аллель А эндотелиальной NO-синтазы реже встречается у больных СД с нефропатией (р < 0,05) и является фактором, достоверно, хотя и незначительно, уменьшающим риск (RR - 0,13) развития последней. Анализ на ассоциацию с патологией с помощью теста на неравновесие (Transmission/Disequilibrium Test) показал ассоциацию аллеля В гена NOS3 (TDT = 4,5, р = 0,034) и аллеля D гена АСЕ (TDT = 3,6, р < 0,05) с ДН. Активность калликреина плазмы крови повышена на ранних стадиях развития нефропатии (гиперфункции). Увеличение активности ангиотензинпревращающего фермента (при нефропатии 57,0 ± 2,9 /мин·л против 38,1 ± 2,8мкмоль/мин·л у больных без нефропатии) при существенном угнетении α - ингибитора (при нефропатии в стадии протеинурии 21,1 ± 1,2 ИЕ/мл против 27,6 ± 1,6 ИЕ/мл без нефропатии) вносит вклад в развитие нефропатии на стадиях микроальбуминурии и протеинурии. Показано, что одним из механизмов формирования ДН при СД1 может быть наличие гиперлипидемии, которая проявляется повышением уровня ХС, ТГ, ХС ЛПНП и снижением ХС ЛЛВП.

Одна из ключевых проблем в преимплантаиионной генетической диагностике наследственных болезней заключается в доступности достаточного количества геномной ДНК для проведения молекулярно-генетического тестирования. Решение этой проблемы неразрывно связано с разработкой специфических подходов к полногеномной амплификации молекулы ДНК, содержащейся в одной доступной для анализа клетке. В обзоре представлена характеристика современных технологий полногеномной амплификации ДНК, обсуждены необходимость, возможность, ограничения и перспективы применения этих подходов к преимплантаиионной диагностике хромосомных и моногенных наследственных заболеваний у человека.

Медицинская генетика. 2005. Т. 4. № 7. С. 342-346.

Искажение реального биологического родства между индивидами в человеческих популяциях является фактором, отрицательно влияющим на результаты генетических исследований и осложняющим медико-генетическое консультирование. Наиболее распространенным источником таких ошибок является ложное отцовство (ЛО), однако не следует недооценивать возможность и других причин (усыновление, дети от другого брака и т.п.). С использованием высокополиморфных молеку-лярно-генетических маркеров нами была оценена частота искажения биологического родства в двух популяциях Томской области - городской и сельской. Первая выборка состояла из 55 семей из Томска со случаями ранней спонтанной гибели эмбрионов, причем данный диагноз исключал возможность сознательного вмешательства родителей в судьбу зародыша. Во второй выборке (пос. Каргала Томской области) были обследованы 53 семьи с 70 здоровыми детьми. Частота ложного отцовства в городской и сельской популяциях составила 5,5 и 7,1% соответственно, а частота других нарушений родственных отношений - 5,7% (в сельской популяции). Таким образом, в Западно-Сибирском регионе России частота нарушений биологического родства между индивидами в семьях колеблется в пределах 5,5-12,8%. Обсуждается необходимость учета этого явления при проведении генетических исследований и медико-генетическом консультировании семей с наследственной патологией.

Цитология. 2005. Т. 47. № 6. С. 526-532.

Приводится краткий обзор принципов и подходов к оценке числовых хромосомных нарушений в интерфазных ядрах клеток с использованием технологии флуоресцентной гибридизации in situ. Дается обоснование собственных критериев оценки результатов гибридизации центромер-специфичных ДНК-зондов с хромосомными мишенями в соматических клетках при двухцветном варианте FISH-анализа. Показано, что применение данных критериев позволяет снизить уровень артефактной гипоплоидии, частота которой оказывается сопоставимой с уровнем гиперплоидии. Этот факт свидетельствует о том, что основной вклад в индукцию анеуплоидии вносит нерасхождение хромосом, а не их отставание в анафазе митоза.

Plasma antioxidant activity was evaluated in the lecithin-Fe2+ model system and cytogenetic studies were carried out in 16 men. A relationship between elevated antioxidant activity of the plasma and increased level of chromatid aberrations and with percentage of aberrant cells was detected in the experimental group, but no correlation was found between antioxidant activity and the integral dose of γ-irradiation and rate of its accumulation. An assumption was made about exhaustion of the “buffer capacity” of the antioxidant defense system resulting from long-term exposure to unidentified factors of technogenic nature increasing plasma antioxidant activity and level of chromosome aberrations. In subjects with high level of antioxidant defense, naturally low antioxidant activity and low percentage of chromatid aberrations were probably maintained.

В модельной системе лецитин-ионы Fe2+ определена антиоксидантная активность плаз-мы крови и проведено цитогенетическое исследование 16 мужчин. В опытной группе установлена связь повышенного уровня антиоксидантнои активности плазмы крови с увеличенным количеством аберраций хроматидного типа и с процентом аберрантных клеток, но корреляции антиоксидантнои активности с интегральной дозой γ-облуче-ния и скоростью ее накопления не наблюдалось. Высказано предположение об истоще-нии ""буферной емкости"" антиоксидантнои защиты организма при продолжительном действии неидентифицированных факторов техногенной природы на человека, кото-рое вызывает повышение антиоксидантнои активности плазмы крови и уровня хромо-сомной изменчивости. Лица с высоким уровнем антиоксидантнои защиты, возмож-но, сохраняют естественную невысокую антиоксидантную активность и низкий про-цент хроматидных аберраций.

The Ile50Val polymorphism of the IL4RA gene was tested for association with chronic viral hepatitis and the character of its progression (the stage of hepatic fibrosis). In total, 61 patients were examined. The control group was a random sample of Tomsk residents (N = 128). Genotyping was based on RFLP analysis. The allele and genotype frequencies of the Ile50Val polymorphism did not significantly differ between the patients and the controls. However, a significant difference in genotype frequency distribution was observed for the patients with different stages of hepatic fibrosis. The frequency of heterozygotes Ile/Val in patients without signs of fibrosis was lower than in the control group (7.1% vs. 51.6%, P = 0.002), while the frequency of the homozygous genotypes was higher. In addition, this subgroup significantly differed in genotype frequency distribution from subgroups of patients with early or severe fibrosis (P = 0.035 and P = 0.004, respectively).

Исследовали связь полиморфного варианта Ile50Val гена IL4RA с клиническими проявлениями хронического вирусного гепатита (ХВГ) и характером течения заболевания, который зависит от степени фиброза печени. Обследовали группу, включающую 61 больного ХВГ, контрольную составила случайная выборка жителей г. Томска (п = 128). Генотипирование этих групп по полиморфизму Ile50Val гена IL4RA проводили с использованием ПДРФ-анализа. Статистически значимых различий в частотах генотипов и аллелей этого полиморфного варианта у больных и в контроле не обнаружено. Однако выявлено различие в распределении генотипов у больных в зависимости от стадии фиброза печени. В подгруппе больных ХВГ без признаков фиброза печени частота гетерозигот Ile/Val меньше (7.1%), чем у контрольной группы (51.6%) (р = 0.002), за счет увеличения частоты гомозигот обоих классов. Подгруппа больных без признаков фиброза характеризуется также различиями в распределении частот генотипов по сравнению с больными с начальной и тяжелой степенью заболевания (р = 0.035; р = 0.004).

The allele and genotype frequency distributions of four STRs (the LPL, vWA, FES/FPS, and F13B loci) commonly used in forensic medicine were studied with a sample of 200 ethnic Russians from Siberia. Genetic and molecular diversity of the four STRs was characterized in comparison with the American Caucasoid population. The set of the four STRs showed a high power of discrimination (PD = 0.99975). Comparison of the genetic variation at the four loci revealed a considerable difference between the Russian and American Caucasoid populations, precluding the use of data on allele frequencies in American Caucasoids for forensic testing in Russia. The results can be used as a reference in Siberia.

Исследовано распределение аллелей и генотипов четырех STR-локусов (LPL, vWA, FES/FPS и F13B), применяемых в судебно-медицинской практике, среди 200 представителей русского населения, проживающего на территории Сибири. Охарактеризовано генетическое и молекулярное разнообразие полиморфных систем в сравнении с европеоидным населением США. Показан высокий дискриминирующий потенциал системы из четырех исследованных STR-локусов (PD = 0.99975). Сравнительный анализ генетического разнообразия исследованных локусов у русского населения и у белых американцев свидетельствует о значимых генетических различиях двух популяций, что делает неприемлемым использование данных по частотам этих локусов у европеоидного населения США в судебно-медицинских экспертизах, проводимых в России. Эти данные могут быть использованы в качестве референтных в работе судебно-медицинских лабораторий Сибири.

В обзоре рассматриваются современное состояние, возможности и перспективы использования интерфазной цитогенетики в оценке геномных мутаций в соматических клетках человека и животных для целей генетической токсикологии и анализа генетической нестабильности. Обсуждаются возможные механизмы действия мутагенов, вызывающих числовые хромосомные нарушения.